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事業の概要
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マウスはヒトのモデル動物として遺伝子機能の解明、病気の治療法や薬の開発に役立っています。特にゲノム情報の解読と、個体レベルの遺伝子操作法の確立により、2006年から欧州、カナダ、米国では国家投資と国際連携による全遺伝子を対象にしたノックアウトマウスの整備が開始されています。我が国でも公的な研究資金により癌、免疫・アレルギー、脳、発生・再生、生活習慣病、感染症等の研究分野でマウスを用いた優れた研究が盛んに行われ、多数のヒト疾患モデルや遺伝子機能の解析モデルが開発されています。天然資源の少ない我が国において、これらの研究成果物は貴重な遺伝資源であり国の財産です。実験動物開発室では2001年度からマウス系統の収集・保存・提供を開始し、2002年度からは文部科学省ナショナルバイオリソースプロジェクト（NBRP）のマウス中核機関として、我が国で開発されたヒト疾患や遺伝子機能の解析モデルを中心に収集・保存・品質管理・提供を実施して参りました。また、米国ジャクソン研究所や欧州マウスミュータントアーカイブとともに世界のマウスリソースセンターの国際連盟Federation of International Mouse Resources（FIMRe: http://www.fimre.org/）を設立し、爆発的に増加するマウスリソースの国際流通を促進する重要な拠点となっています。理研バイオリソースセンターに寄託された系統は国際的マウス系統検索サイトInternational Mouse Strain Resource（IMSR: http://www.findmice.org/）へ登録して世界に発信し、登録系統数は現在ジャクソン研究所に次ぎ世界第2位となっています。
研究者の皆様から寄託していただいた系統はすべて清浄化操作を施し、病原微生物の汚染を完全に除去して提供しています。遺伝子操作マウスについては厳密な遺伝検査により遺伝品質を維持しています。これらの品質管理を徹底するとともに、利用者の皆様からお送りいただく研究成果のフィードバックや日本マウスクリニック（JMC: http://www.brc.riken.jp/lab/jmc/）による表現型データを加えることにより、系統の付加価値を向上します。研究コミュニティーのニーズにこたえるマウス系統の整備に努め、国内外のライフサイエンス研究の推進と国際貢献を果たして行く計画です。
皆様のご利用を心よりお待ち申し上げております。 |
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| 微生物検査 |
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理研BRCでは品質管理の要の一つとして微生物モニタリングを重視しています。検査クラスは、国立大学法人動物実験施設協議会の「実験動物の授受に関するガイドライン」ならびに実験動物中央研究所ICLASモニタリングセンターの微生物モニタリング検査項目を参考に、さらに海外のマウスリソースおよび野生マウス由来系統の寄託・譲渡・提供をも考慮して下記のＡ〜Ｄの４段階に設定しています。
クラスＡはリンパ球性脈絡髄膜炎ウィルスやマウス肝炎ウィルスを始めとする人獣共通感染症病原体あるいはマウス病原性の強い重要な病原体８種類であり、クラスＢはマウス病原性を有する重要な微生物７種類および寄生虫３項目、クラスＣは日和見感染病原体３種類、そしてクラスＤは発癌ウイルスなどの比較的病原性の弱いウイルス11種類を対象としています。 |
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Class A: |
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Clostridium piliforme (Tyzzer's organism), Ectromelia virus、Hantaan virus, Lymphocytic choriomeningitis virus (LCMV), Mouse hepatitis virus (MHV), Mycoplasma pulmonis, Salmonella typhimurium, Sendai virus (HVJ) |
| Class B: |
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CAR bacillus, Citrobacter rodentium, Corynebacterium kutscheri, Dermatophytes, Ectoparasites, Helicobacter bilis, Helicobacter hepaticus, Intestinal protozoa, Pasteurella pneumotropica, Pinworms, Salmonella spp. |
| Class C: |
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Stapylococcus aureus, Pneumocystis carinii f.s. muris, Pseudomonas aeruginosa |
| Class D: |
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Lactate dehydrogenase elevating virus (LDHEV), Mouse adenovirus (MAV), Mouse cytomegalovirus (MCMV), Mouse minute virus (MMV), Mouse norovirus (MNV), Mouse parvovirus (MPV), Mouse polyoma virus (Poly), Mouse rotavirus (EDIM), Pneumonia virus of mice (PVM), Reovirus type 3 (Reo 3), Theiler's mouse encephalomielitis virus (TMEV) |
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検査方法は、ウイルスについては主に血清検査、細菌・真菌については主に培養検査、寄生虫については主に肉眼ないし顕微鏡下での形態学的検査を使用しますが、陽性被疑検体が出た場合、いずれの検査についても二次的な方法を使って確定しています。この他の微生物検査についても対応できる場合がありますので、必要な場合は理研BRCまでお問い合わせください。
なお、検査クラスや検査内容については随時見直しを行っており、予告なく変更することがありますので、予めご了承願います。 |
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| 遺伝検査 |
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| 寄託マウスの受入れから、清浄化操作、凍結保存および生体での系統維持の各過程で、マウス系統の遺伝子型を検査し、遺伝的な品質の維持を行います。 |
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| （1）マウス系統の寄託・譲渡時の品質管理について |
| 総合検査 |
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| 寄託・譲渡個体の数や性別などを確認するとともに、健康状態をマウスの活動、被毛の状態や排便・排尿などからチェックしています。 |
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| 微生物検査 |
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| 寄託・譲渡個体から採血し、クラスＡの微生物検査項目について血清検査を行ないます。この検査は清浄化操作に備え、予め病原体汚染状況を確認するために行なっています。なお、寄託・譲渡個体の微生物汚染は必ず理研BRCにおいて清浄化しますので、理研BRCへの寄託・譲渡マウスが微生物に汚染している場合でも受け入れます。(一部人獣共通感染症病原体を除く)。 |
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| 遺伝検査 |
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| 遺伝子操作系統および原因遺伝子の判明している突然変異系統については、PCRによる遺伝子判定検査を行います。各個体の尾の断片から自動核酸抽出機を用いてゲノムＤＮＡを精製します。寄託者から提供された情報に従ってプライマーを合成しPCRを行います。使用する酵素は、BRCにて検査に用いている酵素の中から最適酵素を選択して、反応条件の最適化を行います。また、遺伝子操作系統においては、主な導入遺伝子の一括検査が可能なKO survey （Nakata H. et. al., Exp. Anim., 58(4), 437-442, 2009）を行い、遺伝子組換え生物の情報の確認を行います。検査の結果で異常が見つかった場合は、寄託者にお問い合わせさせていただき、マウス再送のお願い、または情報の修正を行います。 |
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| （2）維持・保存過程の品質管理について |
| 微生物検査 |
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維持系統は囮システムを用いて定期的（毎２ヶ月）に微生物モニタリングを行います。理研BRCでは個別換気式の飼育ラックを用いているため、囮動物は各ラックに設置した囮ケージに収納し、飼育マウスのケージ交換時に汚れ床敷きを囮ケージに集めています。提供マウスはクラスＡおよびＢについてフリーな状態を維持します。免疫不全系統については、さらにクラスＣについて存否を調べ、陰性の状態を目指します。クラスＤは提供先施設から検査要求された場合のみ提供先費用負担で検査します。
また、Pasteurella pneumotropicaやHelicobacter spp.については、抜き取りで非定期に拭い検査や糞便ＰＣＲ検査を行い、汚れ床敷き式の囮検査を補完しています。 |
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| 遺伝検査 |
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| 遺伝子判定検査 |
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| PCRによる遺伝子判定が必要な系統は、ルーティン検査として、各個体の尾の断片から自動核酸抽出機を用いてゲノムＤＮＡを精製し、寄託時に最適化したプロトコールに従い、遺伝子判定を行います。新たに論文発表等により、PCRによる遺伝子判定が可能になった系統に関しては、逐次、プロトコールを作成します。また、遺伝子欠損マウスの遺伝子判定において、マーカー遺伝子のみを検出しているプロトコールにおいては、Homo/hetero判定可能なプロトコールへの改良を進めます。 |
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| バックグラウンド検査 |
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| 寄託系統の遺伝背景をマイクロサテライトマーカーやSNPなどの系統間で多型がある遺伝子マーカーを用いて検査します。特に、突然変異系統や遺伝子操作系統のコンジェニック系統についてバックグラウンド検査によりバックグラウンド系統（近交系）への置換程度を判定します。 |
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| 蛍光観察 |
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| 全身や組織特異的にGFPなどのレポーター遺伝子を発現する遺伝子操作系統は、PCRによる遺伝子型判定を行うとともに、蛍光顕微鏡を用いて蛍光発現の有無を観察します。 |
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| （3）提供時の品質管理について |
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